Identification d’une souche productrice de protéase isolée du sol d’une laiterie en vue de son utilisation pour la fabrication d’un fromage

Abstract

L’objectif de notre travail consiste dans un première temps à isoler des microorganisme provenant de la terre prélevée à proximité d’une laiterie située à BOUSKEN ( MEDEA) le milieu utilisé est le PCA contenant 10%de lait écrémé stérile au quel on ajouté 2% de l’amidaze . Les bactéries sont cultivées dans un milieu contenant 05% de son blé 0.3 d’extrait de levure 0.4% de glucose 0.2% de caséine 0.3% Na2Hpo4 c’est un milieu qui a été adopté dans des travaux précédent pour la culture Bacillus L’incubation à lieu 30C° pendant 24 h sous agitation 110 rmper l’extraction de l’enzyme s’effectue après filtration du milieu sur un tissu (papier filtre). Le filtre subit une centrifugation à 4 C° pendant 30min. Après avoir testé plusieurs souches nous avons sélectionné une souche BACILLUS SUBTILIS. La souche à été sélectionné par rapport a son activité coagulante très satisfaisant. Nous avons réalisé deux plan d’expérience type composite centre pour le premier la composition du milieu de production et de 05% de son de blé 0.3 % d’extrait de levure 0.3 % d’Na2HPO40.05 de glucose 1.01 de caséine et a T 35°C l’agitation est à 200 VPM. Un deuxième plan nous a donné : 7% son de blé 0.094% caséine 0.3 % d’extrait de levure 0.3% d’Na2HPO4 température est a 40°C est l’agitation est de 150 VPM l’activité coagulant est 2.82up/l. l’activité protéolytique est de Lors de la fermentation la croissance est suivie par dénombrent des colonies en milieu PCA après des dilutions successive Puis coagulante est mesuré . La production de l’enzyme au lieu en fin de phase exponentielle et augmente avec la phase stationnaire.